「試験管ベビー」の最初の保護者は何をしますか?

「試験管ベビー」の最初の保護者は何をしますか?

1978 年 7 月 25 日、世界初の試験管ベビーが誕生し、生殖補助技術の新たな時代が始まりました。発生学者は「試験管ベビー」の最初の保護者であるため、毎年 7 月 25 日は「発生学者の日」と定められています。出産を控えた両親は精子と卵子を発生学者に引き渡し、発生学者は精子と卵子を丁寧に扱い、暖かく大人数の集団環境の中で「試験管ベビー」が健康に成長できるよう神秘的な手術を施す。発生学者の一日の生活がどのようなものかを知りたいですか?どのような時期にどのような神秘的な操作が行われるのでしょうか?一緒に見てみましょう。

7:20 胚実験室品質管理

一年の計画は春から始まり、一日の計画は朝から始まります。そして朝は一日の最高の始まりです。試験管ベビーに良いスタートを切ってもらうために、発生学者は朝に試験管ベビーの生活環境や状態が最も快適であるかどうかをチェックします。これが胚研究室の品質管理です。品質管理の内容は主に、胚実験室の温度、湿度、環境（VOC、酸素含有量、粒子、細菌など）、インキュベーターの品質管理（温度、湿度、CO2、O2含有量など）、手術台の温度、冷蔵庫の温度、液体窒素タンクの液体窒素量と温度、試薬と消耗品のバッチなどです。 1〜2人の胚学者が胚実験室に到着後、上記の品質管理項目をテストします。胚実験室の温度は24〜26℃、湿度は40％〜60％です。二酸化炭素インキュベーターの温度は37℃、CO2濃度は6％、O2濃度は5％である。手術台の保温板の温度は37～38℃に制御されます。上記の条件が満たされていないことが判明した場合は、適時に調整して「試験管ベビー」に暖かく快適な培養環境を提供し、胎児の健全な発育を確保する必要があります。

7:40 IVF 採卵後1日目（D1） 卵子の剥離

体外受精は、培養皿の中で精子と卵子を自由に結合させるプロセスです。精子と卵子の融合プロセスでは、卵丘複合体内の放線冠の卵丘細胞が消化されますが、周辺の顆粒膜細胞はまだ卵子の周囲にしっかりと巻き付いています。発生学者は、卵子の直径よりわずかに大きい卵子剥離針を使用して、卵子を繰り返し吹き飛ばして洗浄し、卵子の周りの顆粒膜細胞が剥がれて、顕微鏡で前核を観察しやすくなることを確認する必要があります。

8:00 胚と受精の観察

胚の発達の時間的および空間的特徴を評価し、凍結または移植用の高品質の胚を選択するには、精子と卵子の受精 (D1)、3日目の卵割段階の胚の発達 (D3)、および胚盤胞段階の胚の発達 (D5 または D6) をすべて特定の時間に観察する必要があります。受精後17～20時間で、D1で倒立顕微鏡で前核を観察し、精子と卵子が受精したかどうかを判断します。 2 つの前核と双極小体が同時に存在する受精卵は正常に受精したとみなされ、さらに培養するために G-1 培地に移されます。 3 つの前核が出現した場合は異常受精とみなされ、直ちに廃棄されます。 1 つの前核が出現した場合、その後の胚の発育を観察するために IVF 周期中に培養が続けられます。卵細胞質内精子注入（ICSI）サイクル中に前核が 1 つ出現した場合、その前核はすぐに破棄されます。精子と卵子の受精状態を判断することに加えて、卵子内の前核の位置、2つの前核の相対的な位置、前核内の核小体の数、および空間分布に基づいて前核にスコアを付けます。通常、受精卵はG-1期からD3期まで培養され、D3期胚は割球分裂率、割球数、断片化の程度によって評価されます。高品質の胚が選択され、G-2 培養培地に置かれて胚盤胞になるまで培養が続けられるか、凍結または移植されます。患者がD3に胚盤胞培養を継続することを選択した場合、D5またはD6に胚盤胞を観察し、胚盤胞の膨張度、内部細胞塊細胞の数、栄養膜細胞の数でスコア付けし、凍結保存または移植用に高品質の胚盤胞を選択し、残りの胚を廃棄する必要があります。

8:00 卵を集める

卵子採取用の G-MOPS-PLUS リン酸緩衝培地を、37°C​​、CO2 フリーのインキュベーターで 30 分前に予熱します。医師はB超音波のガイド下で卵胞液を吸引し、発生学者はすぐに卵胞液を培養皿に移し、実体顕微鏡下で卵丘複合体を観察しました。卵丘複合体を採取し、G-MOPS-PLUS で 2 回、G-IVF で 1 回洗浄した後、バランス調整済みの G-IVF 培地に入れて、37°C​​、6% CO2、5% O2 のインキュベーターで培養し、後で使用することにしました。

8:30、13:30 蘇生

午前中に胚培養室に到着後、発生学者は蘇生のための蘇生液（TS DS WS1 WS2 を含む）を準備します。 TS は 37°C の CO2 フリーインキュベーターで 30 分間予熱され、他の 3 つの蘇生液は室温で 30 分間平衡化されます。朝の蘇生手術は8時30分から始まります。当センターで午前中に蘇生する患者様のほとんどは午前中に蘇生し、午後の胚盤胞移植まで培養を行いますので、その後の培養や移植に影響が出ないよう、8:30までにセンターに到着し確認作業を終えていただくことをお勧めしております。午後13時30分、少数の患者がD3分裂期の胚を蘇生させました。

8:30、13:30 移植

移植は8:30または13:30から開始できます。移植にはなぜ2つの異なる時期があるのですか?何か違いはありますか？ 8:30 移植には、新鮮移植、D3 胚移植、D3 胚融解および胚盤胞培養移植が含まれます。 13:30の移植は主に午前中に蘇生し、体外培養で2時間以上培養された胚盤胞が対象となります。

9:30 ICSI D0 卵子の剥皮

卵の採取は8:00から始まります。 ICSI 周期の患者の場合、卵丘複合体を除去し、G-IVF で 1 ～ 2 時間培養した後、発生学者がよく「卵子剥き出し」と呼ぶ卵子剥き出し手術を実施できます。卵剥ぎとは、卵丘複合体を一定濃度のヒアルロニダーゼで消化し、卵の直径より少し大きい卵剥ぎ針で卵を繰り返し吹き洗いして卵丘細胞と顆粒膜細胞を剥ぎ取る作業です。卵子を剥ぎ取った後、発生学者は卵子に第一極体が含まれているかどうかを顕微鏡で観察する必要があります。第一極体がある場合、卵子は成熟卵子（MII）であり、さらなる培養のためにG-IVF液滴内に置かれます。 ICSI手術は午後13時30分に行われます。卵子に第一極体がない場合、それは未熟卵子（MI、GV）であり、廃棄されます。

9:45 凍った

7:40 胚の観察後、発生学者はD3、D5、D6の高品質胚に関するフィードバックを臨床医に提供します。臨床医は、患者の個々の状態と患者自身の希望に基づいて、高品質の胚の保存先（凍結、移植、胚盤胞培養）を選択します。その後、医師は指示書を胚培養士に返し、胚培養士は医師の指示に従って高品質の胚を凍結保存します。

10:00 メディアの変更

発生学者は、D3 の高品質の胚に関するフィードバックを臨床医に提供します。臨床医は、個々の患者の状態と患者自身の希望に基づいて、高品質の胚を得るために胚盤胞培養を継続するかどうかを決定します。胚培養士は、医師の胚盤胞培養の指示に従い、良質胚に対して培地交換操作、すなわち良質胚をG-1培地からG-2培地に交換し、37℃、6% CO2、5% O2のインキュベーター内で2～3日間培養します。

10:00 生検

着床前遺伝子スクリーニング/診断は、主に単一遺伝子疾患、反復着床不全、反復流産、高齢の患者に使用されます。生検や遺伝子解析技術の進歩により、こうした患者の周期の割合は徐々に増加しています。現在、発生学者が使用する主な生検技術は、胚盤胞栄養膜細胞生検技術であり、マイクロマニピュレーターを使用して3〜5個の栄養膜細胞を吸引し、単一細胞配列を解析して染色体数、構造などを分析します。胚生検後、すべての胚は凍結され、生検結果が出た後、正常な胚が移植用に選択されます。

11:20 体外受精（IVF）

HCG 注射後 38 ～ 40 時間は、発生学者が体外受精を行う時間です。発生学者は、処理された卵子と精子を一定の割合で混合して培養し、精子と卵子が自由に結合して体外受精のプロセスを完了できるようにします。

13:30 顕微授精

ICSI サイクルの卵子への単一精子注入操作は 13:30 に開始され、顕微操作システムを通じて単一の精子が卵子に注入されます。 ICSI後、精子を注入したMII卵子をG-1培養培地に直接移し、37℃、6% CO2、5% O2のインキュベーターでD1前核観察まで培養した。

16:30 卵と早剥き

体外受精の4〜6時間後、発生学者は卵子を取り出し、早期剥離を実施します。目的は、第二極体が排出されるかどうかに基づいて精子と卵子の受精状態を判断することです。 2つ目は精子と卵子の培養環境を改善することです。患者が原発性不妊症で、初めての体外受精周期である場合、2～3 個の卵子が早期に摘出されます。 1～2個の卵子に双極小体が見られれば、受精は良好であることを意味します。受精状況が良くない場合は18:00に再度受精状況を観察します。改善が見られない場合は、直ちに改善的ICSIを実施します。

13:30 溶液を準備し、培養皿上の各患者にラベルを貼付する

卵子の受精、培養、胚培養に使用する培養液は、37℃、6% CO2インキュベーター内で8時間以上バランスをとる必要があります。そのため、翌日の採卵や胚培養に使用する培地を事前に準備しておく必要があります。バランス培養に使用する液体を準備するだけでなく、操作中の検証を容易にするために、患者の診療番号に対応するチップと検証バーコードを各培養皿に貼り付ける必要があります。

上記の業務に加え、発生学者は医療記録登録情報の記入と記録、各種品質管理と胚実験データの入力、実験器具と装置のメンテナンスなども担当しています。舞台裏で黙々と「試験管ベビー」の世話をする発生学者は、受精卵と胚一つ一つを守り、生命の出発点である「試験管ベビー」を手に持っています。